差速离心法干什么用

专家解答(3)添加收藏
张鸿运
【认证专家】张鸿运

认证汽车师傅,拥有多年行业工作经验

+向他提问
最佳答案

离心就是通过转速和时间把混合物分层。这里具体说说两种情况:

1、差速离心法是分步骤的:先用低转速离心让重的物质沉下去,倒掉上面的液体(上清液),再调高转速继续离心,把更轻的物质分开。重复这个过程直到所有物质都分层。这种方法适合那些颗粒大小差异明显的混合物;

2、离心时有个参数叫沉降系数,它反映大分子下沉的速度。计算公式是s=v/(ω²r),其中v是下沉速度,ω是转速(弧度/秒),r是离心半径;

3、沉降系数的单位是S,1S等于十万亿分之一秒(10^-13秒)。大部分蛋白质和核酸的沉降系数在4S到40S之间,比如血红蛋白是4S。细菌核糖体是30S和50S,真核生物的核糖体更大能达到80S,多个核糖体连在一起的多核糖体则超过100S。

金和煦
【认证专家】金和煦

认证汽车师傅,拥有多年行业工作经验

+向他提问

离心技术主要分两种:差速离心法和密度梯度离心法。差速离心法就是换个速度转,低速和高速交替用,靠离心力大小把不同重量的东西分批分开。这种方法适合那些颗粒大小、重量差得特别大的混合物,比如细胞碎片和细胞器这种。密度梯度离心法用的是超高速离心机,专门对付小分子溶液。原理是长时间开一个离心力,让溶液里的成分慢慢沉到自己对应的密度层,最后在离心管里从上到下形成密度由低到高的梯度分布。这种技术常用来分离蛋白质或者病毒颗粒这些小东西,因为它们沉降速度差不多,得靠密度梯度慢慢区分。离心管里最后能形成清晰的分层带,每个带对应不同的物质。这种方法对样品量小但需要高纯度的情况特别管用,不过耗时比较长。超速离心机转起来的时候,离心管里的液体得保持静止,不然梯度会被打乱。所以实验时得特别注意密封和平衡,不然一不小心就会“飞车”了。

任纪昌
【认证专家】任纪昌

认证汽车师傅,拥有多年行业工作经验

+向他提问

差速离心就是通过慢慢调高转速,把细胞器按大小分离开来。刚开始转得慢,大块头的细胞器先沉到底部,小颗粒还在液体里飘着。先把沉底的大块收集起来,剩下的液体用更快的转速离心,把稍微小一点的也沉下去,重复这个过程就能按大小把各种细胞器分开了。